Forscher vom Wyss Institute for Biological Inspired Engineering in Harvard haben erstellt Ein neues Gen-Editing-Tool, mit dem Wissenschaftler Millionen genetischer Experimente gleichzeitig durchführen können.
Forscher nennen diese Technik Retron Library Recombineering (RLR). Eine Technik, die bakterielle DNA-Segmente verwendet retroni, die einzelsträngige DNA-Fragmente produzieren können.
CRISPR ist der "Rivale", den es zu überwinden gilt
CRISPR-Cas9 ist der Superstar, wenn es um die Bearbeitung von Genen geht. In den letzten Jahren hat es in der Welt der Wissenschaft für Aufsehen gesorgt. Hast ergab einen Nobelpreis für diejenigen, die es entdeckt haben, und ein beeindruckendes Werkzeug für diejenigen, die es benutzen. Dank CRISPR können Forscher DNA-Sequenzen leicht verändern.
Die Vorzüge von CRISPR? Viele. Es ist genauer als die zuvor verwendeten Techniken. Es hat eine Vielzahl möglicher Anwendungen, einschließlich lebensrettender Behandlungen für verschiedene Krankheiten. Es gibt jedoch einige wichtige Einschränkungen. Erstens kann es schwierig sein, CRISPR-Cas9-Materialien in großer Anzahl bereitzustellen, was für Studien und Experimente weiterhin ein Problem darstellt. Zweitens kann die Funktionsweise der Technik für Zellen toxisch sein, da das Cas9-Enzym (die molekulare „Schere“ des Gen-Editing-Tools, das für das Schneiden von DNA-Strängen verantwortlich ist) häufig auch Nicht-Zielstellen schneidet.
Gen-Editing mit Retrons
CRISPR-Cas9 schneidet die DNA physikalisch, um die mutierte Sequenz während des Reparaturprozesses in ihr Genom einzubauen. Währenddessen können die Retrons den mutierten DNA-Strang in eine replizierende Zelle einführen, so dass der Strang in die DNA der Tochterzellen eingebaut werden kann. Darüber hinaus können die Backtron-Sequenzen als "Barcodes" oder "Typenschilder" fungieren, sodass Wissenschaftler das Genom modifizieren können, ohne die native DNA zu beschädigen, und mehrere Experimente in einer großen Mischung durchführen können.
Die Ergebnisse der Tests der RRL
Wissenschaftler des Wyss Institute testeten die RLR-Geneditierungstechnik an Bakterien E. coli e Sie fanden heraus, dass 90% der Bevölkerung die vom Rücken getragene Sequenz enthielten nach einigen Änderungen. Sie konnten auch zeigen, wie nützlich es in massiven genetischen Experimenten sein kann. Während ihrer Tests konnten sie Antibiotikaresistenzmutationen in finden E. coli Sequenzierung der "Barcodes" der Backrons anstelle der Sequenzierung einzelner Mutanten, wodurch der Prozess viel schneller wird.
Der Erstautor der Studio Adressen Max Schubert, erklärt: „RLR hat uns erlaubt, etwas zu tun, was mit CRISPR unmöglich ist. Wir haben zufällig ein Bakteriengenom geschnitten, diese genetischen Fragmente in situ in einzelsträngige DNA transformiert und damit Millionen von Sequenzen gleichzeitig gescreent. Es ist ein flexibles Tool zur Bearbeitung von Genen, das die bei CRISPR häufig auftretende Toxizität beseitigt und die Fähigkeit von Forschern verbessert, Mutationen auf Genomebene zu untersuchen. "
CRISPR galt lange Zeit als eine seltsame Sache, die Bakterien taten, und die Frage, wie man es für die Genomtechnik nutzen kann, veränderte die Welt. Retrons sind eine weitere bakterielle Innovation, die auch einige wichtige Fortschritte bringen könnte
Max Schubert
